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这其中有两个技术难点,一个是如何控制crispr-cas9进入到靶细胞,另一个是如何识别目标的切割位点。具体的话,我也有思路了,等我详细的整理一下,再跟你们沟通!”
“张伟老师,你真的已经有思路了?”其中一人小声问道。
“怎么?还怀疑我这个项目负责人啊!”张伟笑着问。
“不是怀疑,我是怕你回去又要翻黄历,咱们毕竟是做科研的,可不能靠看黄历来做项目!”
……
张伟拿着实验报告,找到了孟鹤鸣。
“我做的那个基因编辑,前期的论证已经结束了,也有了成果,赶紧给我打钱!”张伟直接将实验报告扔给了孟鹤鸣。
“这就出成果了?这么快?”孟鹤鸣接过实验报告看了几眼,表情微变,他立刻问道:“怎么不是转录激活因子?”
“我什么时候说过,要做转录激活因子了?我只是说要做一种新的基因编辑技术。”张伟回答道。
“当时国药和三个院士来的时候,你不是说要做转录激活因子的核酸酶技术么?”
“那是钱院士说的,我就是问了一句钱院士,也看过这方面的文献,我可没说要做这种技术啊!”张伟摆出一副一脸无辜的表情。
“嘿!你不做转录激活因子,当时还跟钱院士讨论的热火朝天的?耍我们玩呢!”孟鹤鸣气恼的说道。
“这不是聊天嘛,可不就得没话找话嘛!人家钱院士都起了这个话茬了,我不得继续人家的话茬聊下去,要不多不礼貌!我虽然年轻,这点人情世故还是有滴!”张伟乐呵呵的说。
“得嘞,敢情我成了不通人情世故的那个了!”孟鹤鸣叹了口气,懒得再跟张伟贫嘴,而是低下头看起了张伟的实验报告。
“crispr?这是原核生物基因组的短回文重复序列!利用crispr生成的蛋白,对基因序列进行切割,从而达到基因编辑的目的?”
看完了项目的基本描述,孟鹤鸣脸上顿时挂上了一片骇然。
“你是怎么想到的这种方法的?你的脑子里都装了些什么!”
“装的都是你什么时候给我打钱!”张伟翘着二郎腿,一脸装逼的说道。
“这种思路,我还是第一次见到,你先别说话,让我想想……”孟鹤鸣说着,先摘下了眼镜,揉了揉自己的睛明穴,然后开始认真的思考起来。
片刻后,孟鹤鸣终于发问道:“理论上说,crispr生成的蛋白可以切割病毒的dna,那应该是可以用来进行基因编辑,但这里面却有一个问题。
crispr是细菌免疫系统的一部分,其切割病毒的dna,是为了破坏病毒的dna,杀死病毒,从而使得自身不受到病毒的影响。
如果你使用crispr来进行基因编辑的话,会不会将目标基因序列给破坏掉,从而导致靶细胞整个dna都被破坏?到时候还怎么做后续实验!”
不愧是清大生物系主任,眼光比那些研究生高了好几层楼,一下子就点出了基因剪刀的最大缺点。
基因剪刀好用是好用,成本也不高,但缺点就是这把剪刀太锋利,容易剪错位置。一剪刀下去,一不小心可能误伤了其他基因片段,很容易引发基因组的不稳定性。
现实的动物实验中就发现,使用基因剪刀进行治疗时,会发现大量非预期的单核苷酸突变和更大基因片段的缺失或插入。就是这个原因造成的。
如果说之前的基因编辑技术是效率太低,一刀砍下去命中率还不到25。那么基因剪刀就是效率太高了,一刀砍下去,本来是想来个一刀两断的,但万万没想到这一刀带溅射,一刀砍成了十八段。
对于孟鹤鸣提出来的问题,张伟早已经想到了答案,他开口说道:“我也考虑过,你说的这一问题,的确会出现,我暂时也想不到好的解决方案,目前只能依靠细胞的自我修复了。
当dna双链断裂发生时,细胞会尝试进行修复,如果是非同源末端连接修复的话,虽然会比较快,但可能会导致基因功能的改变。
虽然基因功能的改变,是有可能向着好的方向发展的,但大多数都是糟糕的方向,一旦出现非同源末端修复连接,等于基因编辑失败。
但如果出现的时候同源重组,那情况就不一样了,同源重组的修复速度虽然比较慢,但可以精确的修复细胞的机制,修复断裂的dna,基因编辑也就成功了。
若是可以利用同源重组插入到目标基因的具体部分,就能够解决您刚才提到的问题。不过这并不在我这次的研究范围之内,我这次要做的还是基因编辑技术。”
孟鹤鸣皱着眉头想了想,随后默默的点了点头:“你说的这种方法倒是可行,如果你这种基因编辑技术成功的话,应该会有很多学者,愿意在此基础上研究插入同源重组的技术。”
孟鹤鸣继续看后续的实验报告,表情又是一惊。
“crispr-cas9?你已经找到了可以切割基因序列的蛋白了?这才几天的功夫啊?有几百上千种蛋白吧?你是怎么找到的?”
“主要是我相信老祖宗的智慧!”张伟笑呵呵的答道。
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